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前梯度蛋白2(AGR2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)

CLIA Kit for Anterior Gradient 2 (AGR2)

GOB4; HAG2; XAG2; AG2; PDIA17; HPC8; Anterior Gradient Protein 2; Protein Disulfide Isomerase Family A,Member 17; Secreted cement gland protein XAG-2 homolog

  • 前梯度蛋白2(AGR2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)產品包裝(模擬)
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  • 前梯度蛋白2(AGR2)檢測試劑盒(化學發(fā)光免疫分析法)實驗結果圖
  • SCC285Hu.jpg標準曲線圖
  • Certificate通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測前梯度蛋白2(AGR2),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的前梯度蛋白2(AGR2)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本回收率范圍(%)平均回收率(%)
serum(n=5)99-105102
EDTA plasma(n=5)78-9884
heparin plasma(n=5)93-10298

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的前梯度蛋白2(AGR2),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中前梯度蛋白2(AGR2)含量的測定值與理論值的比率。

樣本1:21:41:81:16
serum(n=5)89-99%89-97%79-104%99-105%
EDTA plasma(n=5)78-93%97-104%85-97%99-105%
heparin plasma(n=5)91-98%79-105%98-105%95-104%

穩(wěn)定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數(shù)。

實驗原理

將前梯度蛋白2(AGR2)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的前梯度蛋白2(AGR2)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的前梯度蛋白2(AGR2)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入底物。加入底物后會產生輝光型光信號。發(fā)射光強度和樣品中的前梯度蛋白2(AGR2)呈正相關。用化學發(fā)光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志參考文獻
Cancer BiomarkersSerum AGR2 as an early diagnostic and postoperative prognostic biomarker of human lung adenocarcinoma[MetaPress: n7137r6271u54118]
Molecular & Cellular ProteomicsIntegrated Proteomic Profiling of Cell Line Conditioned Media and Pancreatic Juice for the Identification of Pancreatic Cancer Biomarkers[PubMed: PMC3205865]
Prostate.Anterior gradient 2 (AGR2): blood-based biomarker elevated in metastatic prostate cancer associated with the neuroendocrine phenotype[Pubmed: 22911164]
BMC Cancer.Validation of four candidate pancreatic cancer serological biomarkers that improve the performance of CA19.9[Pubmed: 24007603]
Clinical Cancer ResearchValidation of Biomarkers That Complement CA19.9 in Detecting Early Pancreatic Cancer[Pubmed:25239611]
PLoS OneAGR3 in Breast Cancer: Prognostic Impact and Suitable Serum-Based Biomarker for Early Cancer Detection[PubMed: 25875093]
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OncotargetIdentification, characterization and application of a new peptide against anterior gradient homolog 2 (AGR2)[Pubmed:29937991]
Int J OncolAnterior gradient protein 2 is a marker of tumor aggressiveness in breast cancer and favors chemotherapy?induced senescence escape[34913074]
International Journal of CancerProteome profiling of enzalutamide‐resistant cell lines and serum analysis identified ALCAM as marker of resistance in castration‐resistant prostate cancer[Pubmed:35689436]