肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)
Multiplex Assay Kit for Heparanase (HPSE) ,etc. by CBA (Cytometric Bead Array)
HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase;
特異性
本試劑盒用于檢測肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 91-103 | 98 |
| EDTA plasma(n=5) | 85-92 | 88 |
| heparin plasma(n=5) | 78-92 | 86 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內加入適量的肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)含量的測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 82-95% | 78-101% | 78-101% | 79-90% |
| EDTA plasma(n=5) | 93-101% | 85-102% | 96-105% | 92-101% |
| heparin plasma(n=5) | 93-105% | 93-103% | 83-101% | 95-102% |
穩(wěn)定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1、向實驗板每孔內加入200μL分析緩沖液以預濕;
2、實驗前標準品、試劑及樣本準備;
3、加樣(標準品、樣本、磁珠),標準品或樣本100μL及磁珠10μL,25°C酶標板振蕩器孵育2小時;
4、磁吸甩干,加檢測溶液A 100μL,25°C酶標板振蕩器孵育1小時;
5、磁吸甩干,加檢測溶液B 100μL,25°C振動孵育30分鐘;
6、磁吸洗板1次;
7、加鞘液100μL,旋渦震蕩10分鐘后讀數(shù)。
實驗原理
將肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)抗體包被于磁性微球表面,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本以及磁珠,其中的肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)抗體,加入PE標記的親和素,用流式細胞儀讀數(shù)。MFI值和樣品中的肝素酶(HPSE)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)濃度呈正相關。
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參考文獻
| 雜志 | 參考文獻 |
| Plos one | PG545, a Heparan Sulfate Mimetic, Reduces Heparanase Expression In Vivo, Blocks Spontaneous Metastases and Enhances Overall Survival in the 4T1 Breast Carcinoma Model[Plosone: Source] |
| Journal of Medical Science | Assessment of heparanase and heparin-binding growth and angiogenesis factors in the uterine cavity ? uid in women with impaired reproduction[Nowinylekarskie:Source] |
| Int J Clin Exp Pathol | Unfractionated heparin attenuates intestinal injury in mouse model of sepsis by inhibiting heparanase[PubMed: 26191183] |
| Tumour Biology | PI-88 inhibits postoperative recurrence of hepatocellular carcinoma via disrupting the surge of heparanase after liver resection[PubMed: 26415733] |
| Journal of Medical Science | Assessment of heparanase and heparin-binding growth and angiogenesis factors in the uterine cavity fluid in women with impaired reproduction[article:84] |
| Renal Failure | Plasma heparanase is associated with blood glucose levels but not urinary microalbumin excretion in type 2 diabetic nephropathy at the early stage [pubmed:28994624] |


