高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)
Multiplex Assay Kit for High Temperature Requirement Factor A4 (HTRA4) ,etc. by CBA (Cytometric Bead Array)
HtrA Serine Peptidase 4
特異性
本試劑盒用于檢測高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質(zhì)交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 84-103 | 94 |
| EDTA plasma(n=5) | 79-89 | 85 |
| heparin plasma(n=5) | 82-101 | 87 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內(nèi)差: CV<10%
批間差: CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內(nèi)加入適量的高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)含量的測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 79-101% | 80-104% | 80-98% | 90-97% |
| EDTA plasma(n=5) | 95-105% | 92-105% | 98-105% | 87-96% |
| heparin plasma(n=5) | 88-99% | 87-105% | 88-95% | 81-98% |
穩(wěn)定性
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1、向?qū)嶒灠迕靠變?nèi)加入200μL分析緩沖液以預濕;
2、實驗前標準品、試劑及樣本準備;
3、加樣(標準品、樣本、磁珠),標準品或樣本100μL及磁珠10μL,25°C酶標板振蕩器孵育2小時;
4、磁吸甩干,加檢測溶液A 100μL,25°C酶標板振蕩器孵育1小時;
5、磁吸甩干,加檢測溶液B 100μL,25°C振動孵育30分鐘;
6、磁吸洗板1次;
7、加鞘液100μL,旋渦震蕩10分鐘后讀數(shù)。
實驗原理
將高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)抗體包被于磁性微球表面,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本以及磁珠,其中的高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入生物素化的高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)抗體,加入PE標記的親和素,用流式細胞儀讀數(shù)。MFI值和樣品中的高溫需求因子A4(HTRA4)等多因子檢測試劑盒(流式熒光法)濃度呈正相關。
贈品
增值服務
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參考文獻
| 雜志 | 參考文獻 |
| Placenta | Upregulation of HtrA4 in the placentas of patients with severe pre-eclampsia[PubMed: 22964307] |
| J Clin Endocrinol Metab | Human HtrA4 Expression Is Restricted to the Placenta, Is Significantly Up-Regulated in Early-Onset Preeclampsia, and High Levels of HtrA4 Cause Endothelial Dysfunction - See more at: http://press.endocrine.org/doi/abs/10.1210/jc.2014-3969#sthash.XcUOSx2Z.dpuf[PubMed: 25946029] |
| Journal?of?Biomolecular?Screening | HtrA3?Isoform-Specific?ELISAs?for?Early?Detection?of?Preeclampsia.[pubmed:27932697] |


