小鼠焦慮模型成功建立的一個(gè)重要方面就是讓小鼠產(chǎn)生焦慮心理，那如何讓小鼠產(chǎn)生焦慮心理呢？云克隆公司采用了高架十字迷宮系統(tǒng)（elevated plus-maze test，EPM）。高架十字迷宮具有一對(duì)開臂和一對(duì)閉臂，嚙齒類動(dòng)物由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng)，但出于好奇心和探究性又會(huì)在開臂中活動(dòng)。該系統(tǒng)利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來(lái)考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于焦慮研究。

那又該如何判斷焦慮模型是否建立成功呢？研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)機(jī)體內(nèi)缺乏gABA時(shí)，會(huì)產(chǎn)生焦慮、不安、疲倦、憂慮等情緒。谷氨酸（Glu）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)含量最高，作用最廣泛的興奮性氨基酸，涉及腦內(nèi)的很多重要生理功能。因此，腦中g(shù)ABA和Glu的表達(dá)情況可作為判斷的標(biāo)準(zhǔn)之一。

1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)健康ICR小鼠，雄性，8周，體重（25±2）g。

2. 實(shí)驗(yàn)主要儀器: 高架十字迷宮系統(tǒng)。

3. 實(shí)驗(yàn)分組

    A組：空白組，10只。B組：給藥組，10只，地西泮，按2mg/kg/天。

4. 主要試劑

γ-氨基丁酸（gABA）檢測(cè)試劑盒：Cloud-Clone Corp. 貨號(hào)CEA900Ge    

    谷氨酸（Glu）檢測(cè)試劑盒：Cloud-Clone Corp. 貨號(hào)CES122Ge  

地西泮片 

    5. 建模方法

    給藥組灌胃給予相應(yīng)劑量的地西泮片，空白組給予相同體積蒸餾水，每天上午、下午各一次，連續(xù)灌胃7 d，每次灌胃量根據(jù)分組按照50ul/10g體重。第8天上午繼續(xù)灌胃給藥一次，灌胃40min后進(jìn)行高架十字迷宮檢測(cè)，于末次給藥前8 h禁食。將小鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮，記錄5 min內(nèi)小鼠的活動(dòng)情況。

   6. 模型的評(píng)價(jià)

   6.1動(dòng)物行為學(xué)觀察：進(jìn)入開放臂次數(shù)、開放臂停留時(shí)間、進(jìn)入閉合臂次數(shù)、閉合臂停留時(shí)間。進(jìn)入開放臂次數(shù)及停留時(shí)間與大鼠的焦慮情緒成負(fù)相關(guān)，進(jìn)入開放臂次數(shù)越少，停留時(shí)間越短，說(shuō)明老鼠的焦慮情緒越嚴(yán)重。

   6.2 檢測(cè)腦中g(shù)ABA和Glu的表達(dá)：給藥組gABA和Glu含量均高于空白組。

更多相關(guān)產(chǎn)品請(qǐng)登錄http://www.cloud-clone.us/。