實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)總翻車?你的細(xì)胞可能早就 “叛變” 了!
實(shí)驗(yàn)室的小伙伴們,是不是都遇到過這種糟心事兒:長期用同一細(xì)胞系做實(shí)驗(yàn),配方、步驟、操作都沒變,可最近的實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻像坐過山車一樣,忽高忽低穩(wěn)不住?你懷疑過試劑失效、儀器故障,甚至懷疑自己的操作手法,但你可能萬萬沒想到 ——真正的 “元兇”,或許是你養(yǎng)了很久的細(xì)胞!
為了幫大家揪出這個(gè)隱藏的實(shí)驗(yàn) “絆腳石”,小編今天來和大家聊聊細(xì)胞系那些容易被忽視的坑!
細(xì)胞系使用中存在著非常普遍卻極易被忽視的風(fēng)險(xiǎn),堪稱實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 “兩大隱形殺手”。
一方面是細(xì)胞身份混淆,實(shí)驗(yàn)室中多株細(xì)胞同時(shí)培養(yǎng)時(shí),可能通過氣溶膠污染或操作疏忽,導(dǎo)致一株細(xì)胞被另一株完全不同的細(xì)胞 “鳩占鵲巢”。研究者本以為在開展A細(xì)胞的相關(guān)研究,實(shí)際使用的卻已是B細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)的 “地基” 從一開始就錯(cuò)了,結(jié)果自然無法穩(wěn)定。另一方面是遺傳漂變,細(xì)胞系在體外經(jīng)過數(shù)十、上百代的傳代后,基因組會(huì)變得不穩(wěn)定,發(fā)生自發(fā)突變和適應(yīng)性改變。這意味著第10代使用的細(xì)胞,和第50代使用的細(xì)胞,在遺傳和功能上可能已經(jīng)有了顯著差異,實(shí)驗(yàn) “地基” 隨時(shí)間悄悄漂移。
想要規(guī)避這些風(fēng)險(xiǎn),讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果重回穩(wěn)定,其實(shí)有兩大關(guān)鍵方法。首先,要在使用前確保所用細(xì)胞的真實(shí)身份,比如定期對細(xì)胞進(jìn)行STR鑒定,操作中盡量單獨(dú)處理同一株細(xì)胞,從操作層面避免交叉污染。其次,不妨選擇更接近生命本真的研究工具——原代細(xì)胞。它是直接從組織中分離出來的,沒有經(jīng)過永生化改造,能最大限度保留來源組織的生理、遺傳和功能特性,讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果更貼近體內(nèi)真實(shí)情況,從根源上提高實(shí)驗(yàn)的可靠性。

當(dāng)然很多人會(huì)擔(dān)心原代細(xì)胞存在難培養(yǎng)、批次間差異大的問題,使用后反而會(huì)引入新的變量。但這正是普通商業(yè)化原代細(xì)胞,與云克隆標(biāo)準(zhǔn)化、自研自產(chǎn)原代細(xì)胞的核心區(qū)別。標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)的原代細(xì)胞,從供體篩選、組織獲取開始,到采用專利的溫和分離技術(shù),再到在標(biāo)準(zhǔn)化、一致性的環(huán)境下進(jìn)行培養(yǎng)和質(zhì)檢,每一個(gè)環(huán)節(jié)的把控,都決定了終產(chǎn)品的均一性。云克隆之所以能實(shí)現(xiàn)這一高標(biāo)準(zhǔn),核心優(yōu)勢在于擁有自己的SPF級動(dòng)物房,從生產(chǎn)源頭開始,就能對細(xì)胞的質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格管控,從根本上解決了原代細(xì)胞難養(yǎng)、批次差異大的行業(yè)痛點(diǎn)。


選擇對的研究工具,就是選擇結(jié)果的可靠性。如果你的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也在 “翻車” 的邊緣徘徊,希望這份分享能幫屏幕前的你撥開迷霧,從此告別波動(dòng)的數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)順利推進(jìn),文章高產(chǎn)不斷!