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IL-18活性蛋白|免疫調(diào)控的核心玩家,促炎領(lǐng)域的研究利器

白介素18(IL-18)原名干擾素γ誘導(dǎo)因子,是白介素家族中重要的促炎細(xì)胞因子,主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及上皮細(xì)胞等分泌,以無活性的前體形式存在,需經(jīng)IL-18轉(zhuǎn)化酶(caspase-1)切割后才具備生物學(xué)活性。作為關(guān)鍵的免疫調(diào)節(jié)分子,IL-18可強(qiáng)效誘導(dǎo)T細(xì)胞、自然殺傷(NK)細(xì)胞等分泌干擾素γ(IFN-γ),促進(jìn)Th1型免疫應(yīng)答,同時(shí)能增強(qiáng)NK細(xì)胞和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的殺傷活性,參與先天免疫與適應(yīng)性免疫的協(xié)同調(diào)控,在抵抗病毒、細(xì)菌等病原體感染中發(fā)揮重要作用。此外,IL-18還可調(diào)節(jié)其他細(xì)胞因子(如TNF-α、IL-2)的產(chǎn)生,參與炎癥反應(yīng)的放大與維持,但過度表達(dá)時(shí)會(huì)引發(fā)免疫紊亂,與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、銀屑病、炎癥性腸病等自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān),同時(shí)其在部分腫瘤微環(huán)境中可通過增強(qiáng)抗腫瘤免疫抑制腫瘤進(jìn)展,而在另一些場景下可能促進(jìn)炎癥相關(guān)腫瘤的發(fā)生,具有雙重病理意義,目前也被視為相關(guān)疾病診斷和治療的潛在靶點(diǎn)。


○ 產(chǎn)品貨號(hào):APA064Hu01

○ 結(jié)合活性驗(yàn)證
研究發(fā)現(xiàn)半胱天冬酶-1(CASP1)是IL-18的相互作用蛋白,為驗(yàn)證兩者結(jié)合特性,我們采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行檢測:將重組人IL-18用含0.01%牛血清白蛋白的PBS緩沖液(pH 7.4)進(jìn)行梯度稀釋,取100μL重復(fù)樣本加入CASP1包被的微孔板,37℃孵育2小時(shí)。經(jīng)PBST洗滌后,加入抗IL-18多克隆抗體孵育1小時(shí),再經(jīng)三次洗滌后與HRP標(biāo)記二抗共同孵育。完成三次洗滌后加入底物溶液,37℃顯色15-25分鐘,最終加入50μL終止液并于450nm波長下立即測定吸光度。結(jié)果顯示(圖1),IL-18與CASP1的結(jié)合具有劑量依賴性特征。
○ 結(jié)果展示