IL-18活性蛋白｜免疫調(diào)控的核心玩家，促炎領(lǐng)域的研究利器
白介素18（IL-18）原名干擾素γ誘導(dǎo)因子，是白介素家族中重要的促炎細胞因子，主要由單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞及上皮細胞等分泌，以無活性的前體形式存在，需經(jīng)IL-18轉(zhuǎn)化酶（caspase-1）切割后才具備生物學(xué)活性。作為關(guān)鍵的免疫調(diào)節(jié)分子，IL-18可強效誘導(dǎo)T細胞、自然殺傷（NK）細胞等分泌干擾素γ（IFN-γ），促進Th1型免疫應(yīng)答，同時能增強NK細胞和細胞毒性T淋巴細胞的殺傷活性，參與先天免疫與適應(yīng)性免疫的協(xié)同調(diào)控，在抵抗病毒、細菌等病原體感染中發(fā)揮重要作用。此外，IL-18還可調(diào)節(jié)其他細胞因子（如TNF-α、IL-2）的產(chǎn)生，參與炎癥反應(yīng)的放大與維持，但過度表達時會引發(fā)免疫紊亂，與類風濕關(guān)節(jié)炎、銀屑病、炎癥性腸病等自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，同時其在部分腫瘤微環(huán)境中可通過增強抗腫瘤免疫抑制腫瘤進展，而在另一些場景下可能促進炎癥相關(guān)腫瘤的發(fā)生，具有雙重病理意義，目前也被視為相關(guān)疾病診斷和治療的潛在靶點。○ 產(chǎn)品貨號：APA064Hu01
研究發(fā)現(xiàn)半胱天冬酶-1（CASP1）是IL-18的相互作用蛋白，為驗證兩者結(jié)合特性，我們采用酶聯(lián)免疫吸附試驗進行檢測：將重組人IL-18用含0.01%牛血清白蛋白的PBS緩沖液（pH 7.4）進行梯度稀釋，取100μL重復(fù)樣本加入CASP1包被的微孔板，37℃孵育2小時。經(jīng)PBST洗滌后，加入抗IL-18多克隆抗體孵育1小時，再經(jīng)三次洗滌后與HRP標記二抗共同孵育。完成三次洗滌后加入底物溶液，37℃顯色15-25分鐘，最終加入50μL終止液并于450nm波長下立即測定吸光度。結(jié)果顯示（圖1），IL-18與CASP1的結(jié)合具有劑量依賴性特征。