血小板因子4（PF4），又稱趨化因子CXCL4，是一種由巨核細(xì)胞合成并儲存于血小板α顆粒中的細(xì)胞因子，在血小板活化時釋放至血液。其成熟體為約70個氨基酸組成的同源四聚體，帶有強正電荷，這一特性使其對肝素等帶負(fù)電荷的糖胺聚糖（GAGs）具有極高的親和力。PF4的主要生理功能包括：在凝血與止血過程中，通過中和血管內(nèi)皮表面的硫酸肝素，局部削弱其抗凝活性，從而促進凝血酶生成和血栓形成；它還能通過與多種趨化因子受體（如CXCR3）相互作用，招募和激活中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞等免疫細(xì)胞，在炎癥反應(yīng)中扮演重要角色；此外，PF4可抑制血管生成，并調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞活性以影響骨代謝。
○ 產(chǎn)品貨號：APA172Mu01
為評估PF4抑制堿性成纖維細(xì)胞生長因子（FGF basic）依賴性人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）增殖的能力，將HUVEC細(xì)胞以每孔3000個細(xì)胞的密度接種于96孔板，在含2%血清的標(biāo)準(zhǔn)DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)基包含1μg/mL重組人FGF1及不同濃度的重組人PF4。培養(yǎng)48小時后，通過倒置顯微鏡觀察細(xì)胞，并采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法檢測細(xì)胞增殖。具體步驟為：向每孔加入10μL CCK-8溶液，37℃孵育1-2小時后用酶標(biāo)儀測定450nm波長處的吸光度。圖1顯示了經(jīng)PF4處理48小時后通過倒置顯微鏡觀察到的HUVEC細(xì)胞增殖情況，圖2展示了通過CCK-8法檢測的PF4處理48小時后的細(xì)胞活性結(jié)果。實驗結(jié)果表明，PF4能顯著抑制HUVEC細(xì)胞的FGF基礎(chǔ)依賴性增殖，其半數(shù)有效抑制濃度（ED50）為3.4μg/mL。
○ 結(jié)果展示
(A)HUVEC cells cultured in DMEM with 1μg/mL FGF1, stimulated with 5μg/mL PF4 for 48h;
(B)Unstimulated HUVEC cells cultured in DMEM with 1μg/mL FGF1 for 48h.
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