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云克隆胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)活性蛋白

IGFBP1

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)

胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)是胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGFBP)家族的成員,由位于人類7號(hào)染色體上的IGFBP1基因編碼,主要在肝臟、子宮內(nèi)膜和蛻膜中表達(dá)。作為一種分泌性蛋白,IGFBP1在血漿中循環(huán),能夠以高親和力結(jié)合胰島素樣生長(zhǎng)因子I和II(IGF-I和IGF-II),從而延長(zhǎng)IGFs的半衰期并調(diào)節(jié)其與細(xì)胞表面受體的相互作用。除了經(jīng)典的IGF依賴性調(diào)節(jié)功能外,IGFBP1還能通過(guò)其C末端的RGD序列與整合素結(jié)合,不依賴IGF直接促進(jìn)細(xì)胞遷移,激活黏著斑激酶(PTK2)和MAPK信號(hào)通路。該蛋白在細(xì)胞代謝、遷移和增殖中發(fā)揮重要作用,其水平異常與多種病理狀況相關(guān)——低水平可能與糖耐量受損、血管疾病和高血壓有關(guān),而高水平則與子癇前期、胎兒生長(zhǎng)受限等妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

○ 產(chǎn)品貨號(hào):APA052Ra61

○ 結(jié)合活性驗(yàn)證
為檢測(cè)重組IGFBP1的活性,我們通過(guò)功能性ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)了重組大鼠IGFBP1與重組人胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF1)的相互作用。簡(jiǎn)言之,用含0.01% BSA的PBS(pH 7.4)將IGFBP1進(jìn)行系列稀釋。隨后將100μl的重復(fù)樣品轉(zhuǎn)移至IGF1包被的微孔中,37℃孵育1小時(shí)。用PBST洗滌孔板后,加入抗IGFBP1多克隆抗體孵育1小時(shí),然后吸棄并洗滌3次。加入HRP標(biāo)記的二抗于37℃孵育1小時(shí)后,吸棄并洗滌5次。加入底物溶液,于37℃孵育15-25分鐘。最后,每孔加入50μl終止液,立即于450/630nm波長(zhǎng)處讀取吸光度。重組大鼠IGFBP1與重組人IGF1的結(jié)合活性如圖1所示,其半最大效應(yīng)濃度(EC50)為0.222μg/mL。