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  • 多因子檢測(cè)試劑盒:從“不知所措”到“得心應(yīng)手”—— 常見問題解答

    多因子檢測(cè)技術(shù)因其“一次實(shí)驗(yàn),多重?cái)?shù)據(jù)”的高效性,正迅速成為生命科學(xué)研究的熱門工具。然而,許多研究者,尤其是首次接觸的用戶,在試劑盒選擇、實(shí)驗(yàn)操作和數(shù)據(jù)分析等環(huán)節(jié)常常面臨諸多困惑。基于我們與大量用戶的深入溝通,本文將我們最常被問及的核心技術(shù)問題、操作疑難及解決方案整理了出來(lái)。無(wú)論您是正在為選購(gòu)試劑盒做前期調(diào)研,還是實(shí)驗(yàn)過程中遇到了瓶頸,希望這份FAQ對(duì)您的研究能有所幫助。一、兩類多因子檢測(cè)試劑盒該如何選?云克隆有配套Luminex磁珠和配套CBA(Cytometric Bead Array)微球的試劑盒,客戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室儀......

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  • 原代細(xì)胞常見問題指南,一文解決原代細(xì)胞使用的所有困惑

    原代細(xì)胞實(shí)驗(yàn)流程繁瑣、細(xì)節(jié)性極強(qiáng),為幫助廣大科研人避開實(shí)驗(yàn)雷區(qū)、高效推進(jìn)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。本文依托云克隆原代細(xì)胞常見問題(FAQs),從核心概念、運(yùn)輸儲(chǔ)存、復(fù)蘇培養(yǎng)、傳代鑒定、培養(yǎng)基選擇、定制服務(wù)等全維度,系統(tǒng)梳理原代細(xì)胞從采購(gòu)到實(shí)驗(yàn)的完整流程,把最實(shí)用、最核心的知識(shí)點(diǎn)講透,助力每一位科研人輕松駕馭原代細(xì)胞。一、原代細(xì)胞與細(xì)胞系,到底該選誰(shuí)?科研新手常糾結(jié)原代細(xì)胞與細(xì)胞系的選擇,二者核心差異決定實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信度與應(yīng)用場(chǎng)景。原代細(xì)胞取自活體組織,保留體內(nèi)生理功能、分化狀態(tài)及信號(hào)通路,貼近真實(shí)生理環(huán)境,是機(jī)......

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  • 如何讓W(xué)B的結(jié)果更完美?

    在Western Blot(WB)的實(shí)驗(yàn)過程中,總會(huì)遇到各種各樣的問題:沒有條帶,雜帶多,轉(zhuǎn)膜不成功,曝光時(shí)間把握不好……不要著急,根據(jù)多年的WB經(jīng)驗(yàn),我們總結(jié)了以下WB實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)各種突發(fā)狀況的分析和處理方法:1.SDS-PAGE出現(xiàn)異常條帶1)微笑現(xiàn)象處理方法:可能是由于凝膠的中間部分凝固不均導(dǎo)致,待其充分凝固后再做實(shí)驗(yàn)。2)拖尾現(xiàn)象處理方法:可能是由于樣品融解效果不佳或分離膠濃度過大引起。建議:加樣前離心;加適量樣品促溶劑;電泳緩沖液時(shí)間過長(zhǎng),重新配制;降低凝膠濃度。3)條帶粗處理方法:可能是由于濃縮膠未濃縮好。......

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  • 酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒代測(cè)實(shí)驗(yàn)常見問題及解答

    Q1:ELISA代測(cè)需要用到的儀器A1:ELISA代測(cè)需要儀器如下:1、酶標(biāo)儀Microplate reader 廠家:Biotek; 型號(hào):ELx8082、恒溫箱Incubator 廠家:sanyo; 型號(hào):MIR-2623、洗板機(jī)Microplate Washer廠家:北京拓?fù)浞治鰞x器有限公司; 型號(hào):DEM-3型Q2:不知道如何完成標(biāo)曲擬合和樣本測(cè)算?需要用到什么軟件。A2:用EXCEL軟件即可完成樣本的測(cè)算。其中雙抗夾心試劑盒參看雙抗夾心ELISA試劑盒標(biāo)曲擬合及樣本測(cè)方法,而競(jìng)爭(zhēng)抑制試劑盒參看競(jìng)爭(zhēng)抑制ELISA試劑盒標(biāo)曲擬合及樣本測(cè)算方法。Q3:用于ELISA檢測(cè)的樣本制備方法和保存方法。A3:ELISA檢測(cè)的常......

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  • 流式細(xì)胞術(shù)(FCM)常見問題及解答

    FCM是利用流式細(xì)胞儀對(duì)處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的單列細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行逐個(gè)、多參數(shù)、快速的定性、定量分析或分析技術(shù)。然而,在FCM的實(shí)際應(yīng)用過程中,要想得到高質(zhì)量的流式數(shù)據(jù)卻并非易事。現(xiàn)就FCM實(shí)驗(yàn)中的常見問題進(jìn)行分析,希望能幫助相關(guān)實(shí)驗(yàn)人員提高實(shí)驗(yàn)成功率。1. 怎么選擇合適的對(duì)照?1)同型對(duì)照:使用同型抗體做平行實(shí)驗(yàn),主要目的是消除抗體與樣本的非特異性結(jié)合。2)陰性細(xì)胞對(duì)照:使用已知的不表達(dá)目標(biāo)抗原的細(xì)胞做平行實(shí)驗(yàn),主要目的是消除抗體的非特異性結(jié)合。3)二抗對(duì)照:第二抗體多為熒光標(biāo)記的多抗,非特異性結(jié)......

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  • ELISA實(shí)驗(yàn)樣本測(cè)值低原因分析和建議解決方案

    ELISA實(shí)驗(yàn)樣本測(cè)值低原因分析和建議解決方案ELISA 實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)者經(jīng)常會(huì)遇到樣本測(cè)值低的問題,針對(duì)這一問題,分析了可能原因和解決方法。分析原因解決方法試劑盒保存不當(dāng),導(dǎo)致試劑部分或完全失效。請(qǐng)按說(shuō)明書要求保存試劑盒。檢測(cè)液 A、檢測(cè)液 B、標(biāo)準(zhǔn)品以及酶標(biāo)條等儲(chǔ)存在-20 oC,而其它試劑需儲(chǔ)存在 4 oC。樣本反復(fù)凍融,樣本反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致樣本中蛋白降解。收集樣本制備后,需進(jìn)行分裝后凍存-20oC或-80oC,避免樣本反復(fù)凍融。樣本保存不當(dāng)或保存時(shí)間過長(zhǎng)。長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存有可能導(dǎo)致目標(biāo)蛋白的降解, 致使檢測(cè)結(jié)果不理想。建議使......

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  • 蛋白質(zhì)印跡(WB)常見問題及解答

    蛋白質(zhì)印跡(Western Blot)是根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理檢測(cè)復(fù)雜樣本中的某種蛋白的方法。將混合抗原樣本在凝膠板上進(jìn)行單向或雙向電泳,經(jīng)過 PAGE 分離的蛋白質(zhì)樣品,轉(zhuǎn)移到固相載體上,固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì),且能保持電泳分離的類型及其生物學(xué)活性不變。以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原,與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng),再與或標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過底物顯色或放射自顯影以檢測(cè)電泳分離的特異性目的基因表達(dá)的蛋白成分。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于鑒定蛋白以及對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。蛋白質(zhì)印跡分為蛋白質(zhì)分離、......

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  • 免疫組織化學(xué)(IHC)常見問題及解答

    免疫組織化學(xué)技術(shù)又稱免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù),是指用標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測(cè)定的一項(xiàng)免疫檢測(cè)方法。它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性和分子生物技術(shù)的敏感性等巧妙結(jié)合,借助顯微鏡的顯像和放大作用,在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平檢測(cè)各種抗原物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、多肽、酶、激素、病原體以及受體等),是單一的靜止的形態(tài)學(xué)描述,上升到結(jié)構(gòu)、功能和代謝為一體的動(dòng)態(tài)觀察,為疾病的診斷、鑒別診斷和發(fā)病機(jī)制的研究提供了強(qiáng)有力的手段。然而,要想得到一張高質(zhì)......

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