常見(jiàn)免疫檢測(cè)的抗體標(biāo)記種類(lèi)
查看詳情標(biāo)記抗體是免疫電鏡樣品制備的一種常見(jiàn)方法，該技術(shù)由于操作簡(jiǎn)單、靈敏度高，常應(yīng)用于IHC，WB，ICC，ELISA等實(shí)驗(yàn)。通過(guò)標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來(lái)定位分析抗原，是目前市面上理想的快速價(jià)廉的定量檢測(cè)方法?？贵w標(biāo)記主要有酶標(biāo)記、熒光素標(biāo)記、同位素標(biāo)記、生物素標(biāo)記等，還有一些其他的標(biāo)記方法例如膠體金標(biāo)記，下面具體來(lái)展示云克隆公司研發(fā)的抗體標(biāo)記種類(lèi)：1、辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記，HRP標(biāo)記單抗和多抗的常用方法是過(guò)碘酸鈉法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，隨后與抗體蛋白的氨基結(jié)合，形成Schiff堿。常用的HRP的底物有鄰苯......
APOB家族及其受體的檢測(cè)
查看詳情人體APOB由APOB基因進(jìn)行編碼，血漿中極低密度脂蛋白(VLDL )，中間密度脂蛋白(IDL)中均含有APOB。APOB的水平變化與脂質(zhì)代謝，動(dòng)脈粥樣硬化等腦血管等疾病密切相關(guān)，是目前臨床研究的熱點(diǎn)。APOB在LDL中發(fā)揮作用的機(jī)理功能尚待研究。血漿中APOB以APOB48和APOB100這兩種形式存在，其中APOB48主要在小腸中合成，而APOB100主要在肝臟中合成。APOB100是APOB群中最大的蛋白，通常提到的APOB實(shí)際上指的就是APOB100，它有4563個(gè)氨基酸。APOB48與APOB100有共同的N端結(jié)構(gòu)，它是由編碼APOB100的基因序列在第2153個(gè)氨基酸處產(chǎn)生了終止密碼子而編碼......
免疫組織化學(xué)原理圖
查看詳情免疫組織化學(xué)又稱(chēng)免疫細(xì)胞化學(xué)，是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過(guò)抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng)，對(duì)相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測(cè)定的一項(xiàng)新技術(shù)。原理圖如下：最常選用的免疫學(xué)檢測(cè)方案之一。免疫組化實(shí)驗(yàn)中抗原修復(fù)方法的選擇，抗體工作濃度的確定和染色方案等步驟都是決定實(shí)驗(yàn)成敗與否的關(guān)鍵。許多實(shí)驗(yàn)人員面對(duì)繁瑣的實(shí)驗(yàn)步驟，往往得到了不盡如人意的結(jié)果。在此，提前告訴大家一個(gè)好消息，Cloud-clone. Corp已開(kāi)展免疫組化代測(cè)服務(wù)?。?！具體情況，會(huì)在下一次的專(zhuān)題中公布，敬請(qǐng)期待！更多信息，請(qǐng)查閱htt......
重組蛋白的詳細(xì)構(gòu)建方法
查看詳情應(yīng)用重組DNA將目標(biāo)基因進(jìn)行表達(dá)得到的蛋白質(zhì)成為重組蛋白，重組蛋白在生物信號(hào)傳導(dǎo)過(guò)程，藥物研發(fā)，科學(xué)研究中扮演著重要角色。下面來(lái)介紹一下重組蛋白的生產(chǎn)工藝流程。1.基因擴(kuò)增（1）引物合成搜索目標(biāo)蛋白基因信息，結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)信息，選取片段或全長(zhǎng)設(shè)計(jì)引物。注意避開(kāi)跨膜區(qū)，以及復(fù)雜的二級(jí)結(jié)構(gòu)，優(yōu)選N端或C端，引物評(píng)分盡可能高，并搜索出核酸序列的酶切位點(diǎn)，使用載體等信息。經(jīng)研發(fā)部根據(jù)研發(fā)經(jīng)驗(yàn)提出修改意見(jiàn)最終定稿后交由第三方公司進(jìn)行引物合成。（2）基因克隆機(jī)重組鑒定1）PCR根據(jù)目的蛋白特異性表達(dá)組織，選取特異......
雙抗夾心法CLIA檢測(cè)原理
查看詳情雙抗夾心化學(xué)發(fā)光法（CLIA）是將雙抗體夾心法與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)結(jié)合在一起的檢測(cè)方法。它的一般實(shí)驗(yàn)步驟包括：將特異性針對(duì)待測(cè)抗原的抗體包被于 96 孔微孔板中，制成固相載體；向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，使待測(cè)抗原與連接于固相載體上的抗體結(jié)合；此后加入生物素化的針對(duì)待測(cè)抗原的抗體，形成夾心；再將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入 HRP 標(biāo)記的親和素，再次徹底洗滌后加入魯米諾發(fā)光底物，并用光子計(jì)數(shù)器，讀出各孔的相對(duì)光度值（RLU）。此法與雙抗夾心ELISA法的區(qū)別在于采用了增強(qiáng)型的ECL發(fā)光體系作為發(fā)光底物試劑來(lái)實(shí)......
免疫組織化學(xué)樣本處理I
查看詳情免疫組織化學(xué)用于觀(guān)察標(biāo)本的染色結(jié)果對(duì)靶抗原抗體進(jìn)行鑒定和定位，其標(biāo)本制備非常重要。在制作標(biāo)本過(guò)程中，需保持抗原的完整性，在染色、洗滌包埋等過(guò)程中避免發(fā)生溶解和變性，同時(shí)防止擴(kuò)散至鄰近細(xì)胞或組織間隙中。圖1. IHC結(jié)果示意圖組織材料的處理是獲得良好免疫組織化學(xué)結(jié)果的前提，活體組織，各種體液及穿刺液和細(xì)胞都可以用于免疫組化分析，針對(duì)不同的標(biāo)本類(lèi)型可以選擇不同的制備方法?；铙w組織常選用石蠟切片和冰凍切片處理，而體液、穿刺液及細(xì)胞樣本則選用涂片方式處理。對(duì)于細(xì)菌菌落或尸體病變組織，可將新鮮切面壓印于玻......
單克隆抗體的詳細(xì)制備方法
查看詳情自Kohler和Milstein建立了淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)后，他們將只針對(duì)一種抗原決定簇產(chǎn)生抗體B淋巴細(xì)胞和能無(wú)限增殖的腫瘤細(xì)胞融合雜交，產(chǎn)生既能分泌抗體，又能無(wú)限增殖的雜交融合細(xì)胞，它所產(chǎn)生的抗體是針對(duì)同一抗原決定簇的高度同質(zhì)的抗體，即單克隆抗體（monoclonal antibody），簡(jiǎn)稱(chēng)單抗。與多抗相比，單抗純度高，專(zhuān)一性強(qiáng)、重復(fù)性好、且能持續(xù)地?zé)o限量供應(yīng)。單抗技術(shù)的問(wèn)世，不僅帶來(lái)了免疫學(xué)領(lǐng)域里的一次革命，而且它在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域獲得極廣泛的應(yīng)用，促進(jìn)了眾多學(xué)科的發(fā)展。單克隆抗體制備的基本過(guò)程如下：（1）用抗原......
降鈣素原，常規(guī)感染檢查的侯選者?
查看詳情隨著抗生素在臨床中使用地越來(lái)越廣泛，加上新的病毒如SARS，H7N9等的發(fā)現(xiàn)，新的問(wèn)題也隨之而來(lái)。由于部分患者臨床病情隱匿或不典型，并且受到醫(yī)生個(gè)體臨床思維及經(jīng)驗(yàn)局限的影響，癥狀相似疾病的確診往往也變得困難起來(lái)。特別是對(duì)于細(xì)菌性感染和非細(xì)菌性感染，其治療手段完全不同，一旦出現(xiàn)誤診，有可能會(huì)造成錯(cuò)過(guò)最佳診療時(shí)間，導(dǎo)致病情惡化等嚴(yán)重后果。因此，我們?cè)谂R床上應(yīng)該如何判斷患者到底是細(xì)菌性感染還是非細(xì)菌性感染呢？實(shí)驗(yàn)人員在研究中發(fā)現(xiàn)，PCT（降鈣素原，procalcitonin）是一種非常特殊的蛋白質(zhì)，其結(jié)構(gòu)如圖1所示當(dāng)嚴(yán)......